電話：
86-010-82382578傳真：
86-010-82382580
這個標準方法可以說是目前所有食品檢驗機構和食品生產(chǎn)企業(yè)微生物學實驗室質(zhì)量控制的基礎。雖然篇幅大，規(guī)定多，但是標準各章節(jié)的描述都不夠詳盡，在具體操作細節(jié)方面更是存在各種疏漏，檢驗機構困惑較多，理解應用時也常常出現(xiàn)偏差，影響了標準的實施效果。檢驗機構現(xiàn)場評審時，在培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制環(huán)節(jié)被開不符合項的情況極為常見。
1微生物學檢驗培養(yǎng)基質(zhì)量控制的意義
目前，作為我國現(xiàn)行食品安全標準體系配套的強制性標準《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗》(GB 4789系列)都是以傳統(tǒng)微生物學培養(yǎng)為基礎的經(jīng)典檢驗方法。培養(yǎng)基及相關配套試劑是微生物學常規(guī)檢驗方法必須采用的生化試劑，培養(yǎng)基及試劑質(zhì)量會直接影響到檢驗結果的準確性，因此，必須做好培養(yǎng)基及試劑的質(zhì)量控制。涉及食品微生物學檢驗的培養(yǎng)基種類繁多。近年來，隨著市場經(jīng)濟的發(fā)展，商品化培養(yǎng)基的應用越來越普及。基于種種原因，它們的配方、用途、使用方法、保存方式各不相同，給實驗室質(zhì)量控制帶來了新的問題。
現(xiàn)行有關微生物學檢驗用培養(yǎng)基質(zhì)量控制的標準或規(guī)定，除了2013版標準之外，CNAS-CL09:2013《檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明》規(guī)定實驗室對于培養(yǎng)基和試劑的驗收可參考ISO 11133 — 2014《食品、動物飼料和水的微生物學-營養(yǎng)培養(yǎng)基的制備、生產(chǎn)、存儲和性能測試》或修改采用ISO 11133制定的SN/T 1538.1— 2016《培養(yǎng)基制備指南 第1部分：實驗室培養(yǎng)基制備質(zhì)量保證通則》和SN/T 1538.2— 2016《培養(yǎng)基制備指南 第2部分：培養(yǎng)基性能測試實用指南》進行[2，3]。但是，這些相關標準或規(guī)定受限于應用領域，作為微生物學檢驗培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制依據(jù)也不完備，多數(shù)商品化培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)也未據(jù)此作為質(zhì)量控制標準，而檢驗機構對自行配制的培養(yǎng)基進行質(zhì)量控制的情況更少，導致培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量參差不齊。
據(jù)相關調(diào)查，國產(chǎn)培養(yǎng)基的質(zhì)量均有嚴重問題[4]。中國國家認證認可監(jiān)督管理委員會通報的CNAS實驗室現(xiàn)場評審在《服務和供應品的采購》這個環(huán)節(jié)的常見不符合項zui多，主要是未建立培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制程序、不能提供關鍵培養(yǎng)基技術性驗收評估記錄和不能提供實驗室用水符合性評價記錄，說明多數(shù)檢驗機構對于培養(yǎng)基和試劑的相關標準和規(guī)定的理解、執(zhí)行都存在偏差。
2 培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制的要求
在中國國家認證認可監(jiān)督管理委員會發(fā)布的《檢驗檢測機構資質(zhì)認定評審準則》4.5.6條款中，規(guī)定“檢驗檢測機構應建立和保持選擇和購買對檢驗檢測質(zhì)量有影響的服務和供應品的程序。明確服務、供應品、試劑、消耗材料的購買、驗收、存儲的要求”，就是要求“在中華人民共和國境內(nèi)，向社會出具具有證明作用的數(shù)據(jù)、結果的檢驗檢測機構”為保證采購物品和相關服務的質(zhì)量，應當按制定的程序?qū)υ噭┻M行有效的控制和管理，以保證檢驗檢測結果的質(zhì)量[5]。雖然文件有規(guī)定，但是具體如何執(zhí)行，需要檢驗機構結合自身實際情況制定程序性文件。2013版標準只是食品安全國家標準，適用范圍于食品微生物學檢驗領域，而目前其他微生物學檢驗領域并沒有適用的培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制標準，所以建議所有涉及微生物學檢驗領域的檢驗機構都執(zhí)行或參照執(zhí)行2013版標準，制定適合本實驗室的培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制程序性文件。
32013版標準的具體要求和存在問題
1.術語和定義
本章節(jié)主要缺陷是定義描述不到位和前后術語不一致。同時遺漏了診斷血清、測試紙片、生化鑒定試劑盒等常用微生物檢驗試劑。另外，標準將培養(yǎng)基和試劑分為11類，分類方法與ISO 11133分為6類有所不同。例如，將選擇性計數(shù)培養(yǎng)基分為選擇性固體計數(shù)培養(yǎng)基和選擇性液體計數(shù)培養(yǎng)基，明顯就是畫蛇添足。
2. 缺少“設備和儀器”
作為一個既有檢驗方法又有判定依據(jù)的標準，缺少對于設備和儀器的規(guī)定，是不可想象的。
3. 培養(yǎng)基及試劑質(zhì)量保證
這個章節(jié)分為證明文件、貯存、培養(yǎng)基的實驗室制備、培養(yǎng)基的使用、培養(yǎng)基的棄置五個部分。建議檢驗機構按照這個框架規(guī)定培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量控制程序。這個章節(jié)存在的問題，主要是對培養(yǎng)基保質(zhì)期規(guī)定太松、配制用水電阻率錯誤、pH測定溫度不適用、培養(yǎng)基的棄置可操作性不強。而目前現(xiàn)場評審時，實驗室被核查到的常見錯誤，除了培養(yǎng)基配制原始記錄信息不全這個通病外，幾乎所有實驗室都沒有做到“傾注瓊脂量達到3 mm以上厚度”，屬于未認真學習標準規(guī)定。
4. 質(zhì)控菌株的保藏及使用
這個章節(jié)，除了使用術語與第二章規(guī)定不一致外，zui重要的問題是描述和規(guī)定不夠詳盡，也未考慮生物安全相關標準要求，因此與CNAS-CL09:2013、GB 4789.1-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 總則》、GB 19489-2008等其他實驗室質(zhì)量控制管理規(guī)定要求不一致[2，6，7]，容易理解錯誤。
5.培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求
(1)基本要求
本條規(guī)定供應商和制備者應進行培養(yǎng)基和試劑的20℃～25 ℃的pH和緩沖能力特性評估，前者與標準全文都在25 ℃測定pH的規(guī)定不符，后者則是全文都沒有出現(xiàn)如何檢驗、如何判定的描述。
(2)微生物學要求
概論規(guī)定實驗室應“制定驗收程序，如需進行驗證，可按6.2執(zhí)行”。對此條款，目前多數(shù)檢驗機構并未理解，除了沒有制定明確的培養(yǎng)基和試劑驗收程序外，也不知道哪些培養(yǎng)基和試劑需要進行驗證。其實，就是有第三方檢驗機構檢驗報告判定“達到附錄D質(zhì)量控制標準的要求”的，以及對檢驗結果沒有直接影響的培養(yǎng)基和試劑，不需要驗證。在“5.2.3.2測試菌株”條，使用了與第四章“質(zhì)控菌株”不一樣的術語。這個條款中，規(guī)定了根據(jù)培養(yǎng)基和試劑類型的不同，采用的測試菌株數(shù)量。在現(xiàn)場評審時，常見評審員要求實驗室必須使用附錄E里面的全部菌株進行測試，或?qū)嶒炇覂H用一株菌株進行選擇性培養(yǎng)基測試等等情況，都屬于對標準理解錯誤。
6. 培養(yǎng)基和試劑性能測試方法
總體來說，2016版標準考慮到我國中小型實驗室進行全部培養(yǎng)基和試劑驗證的工作量，并未一味照搬標準的要求，人性化規(guī)定了實驗室可以使用半定量和定性測試方法驗證培養(yǎng)基和試劑，有利于實驗室執(zhí)行并開展。不足之處是，本章節(jié)文字、語法及描述性錯誤太多，影響了標準的實施效果。
7.測試結果的記錄
7.1條要求“培養(yǎng)基制造商或供應商應按客戶的要求提供培養(yǎng)基常規(guī)信息和相關測試菌株生長特性信息。”與3.1.1條“生產(chǎn)企業(yè)提供的文件”屬于重復規(guī)定。
7.2條要求“按照質(zhì)量體系的要求，對所有培養(yǎng)基性能測試的數(shù)據(jù)歸檔，并在有效期內(nèi)進行適當?shù)谋４妗?rdquo;實際上，任何質(zhì)量控制體系都沒有規(guī)定必須對所有培養(yǎng)基進行性能測試，用于輔助檢驗用的培養(yǎng)基，如菌種保存、實驗室內(nèi)部環(huán)境監(jiān)控的那些培養(yǎng)基，并不強制進行性能測試，只要對關鍵性培養(yǎng)基和試劑進行驗證即可。
8. 附錄
這個部分除了因為涉及面比較廣，各種文字錯誤也相當多。
附錄A的表A.1中，如“顏色異常”的可能原因中，就缺少了“配制原料錯誤”、“容器污染(如異常熒光)”這樣的常見問題。
附錄B中，除了流程圖有缺陷外，甘油添加量10%～15%明顯太少。
附錄C的主要問題是使用的培養(yǎng)基成分名稱與5.1.2條“基礎成分”描述不一致。在附錄D、附錄E中，分別規(guī)定了生產(chǎn)企業(yè)或?qū)嶒炇易灾婆囵B(yǎng)基和實驗室使用商品化培養(yǎng)基的具體質(zhì)量控制標準。其中除了文字錯誤多外，還存在缺少對生理鹽水等常用培養(yǎng)基的規(guī)定、使用生物危害較大的菌株作為試驗菌株、用A/A、K/A、K/K描述結果不符合GB 4789.1— 2016規(guī)定、部分培養(yǎng)基不可能達到評定標準等主要問題。
附錄F“螺旋平板法”是6.1.1.3條采用的，但是其內(nèi)容規(guī)定的全部是樣品檢驗方法，并報告樣品中菌落數(shù)，*不適用于培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。2013版標準的7.2條“建議使用測試結果記錄單(見附錄G)進行文件記錄并評價測試結果”。實際上，附錄G作為原始記錄表格，缺少配制用水、儀器設備、環(huán)境條件、處理方式、包裝規(guī)格等關鍵信息，同時表格中要求進行的凝膠穩(wěn)定性、粘稠度等指標，在2013版標準全文中并沒有提及如何檢驗、如何判定，所以，附錄G*不符合實驗室質(zhì)量管理體系要求。
參考文獻：
[1] GB 4789.28-2013. 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求[S].2013
[2] CNAS-CL09:2013. 檢測和校準實驗室能力認可準則在微生物檢測領域的應用說明[S].2016
[3] ISO 11133-2014，Microbiology of food, animal feed andwater -- Preparation, production, storage and performance testing of culturemedia [S].2014
[4] 居建華，顧偉忠，姚積源，等. 商品培養(yǎng)基使用的實驗室質(zhì)量控制[J].上海預防醫(yī)學雜志. 2000，12(11):515～517
[5] 國家認監(jiān)委關于印發(fā)《檢驗檢測機構資質(zhì)認定評審準則》及釋義和《檢驗檢測機構資質(zhì)認定評審員管理要求》的通知(2016-06-02)[2018-01-30].http://www.cnca.gov.cn/xxgk/gx/2016/201606/t20160602_51598.shtml.
[6] GB 4789.1-2016. 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 總則[S].2016
[7] GB 19489-2008. 實驗室 生物安全通用要求[S].2008
86-010-82382578
86-010-82382580
15810002992
